故事發生在抗日戰爭初期。國軍中校馬烽（宋佳倫 飾）奉命組建“025敢死隊”，以伺機襲擊南京城內的日寇，他從被即將行刑的死囚中挑選了五個他認為合格的隊員，他們是蘇維埃政府軍械部長麻老五（韓童生 飾）、中情局特工徐飛虎（楊猛 飾）、飛賊唐人杰（郭鐵城 飾）、以及強大龍（鐵鶴 飾）和朱大山。經過嚴格布置后，馬烽帶他們進入日寇鐵蹄下的南京城，成功營救出兩名援華的美國醫生，并保護了他們所拍攝的南京大屠殺膠片。之后，他們冒著極大風險，成功刺殺日軍駐南京最高指揮官熊本連太郎，并奪回國寶——傳國玉璽。最后，他們為給殉難的三十萬同胞復仇，決定在日軍高官開會時與敵人同歸于盡……
麻老五沖進店堂，接應馬烽殺了出來，徐飛虎搶來摩托，三人邊打邊撤，脫離了虎口。馬烽和麻老五終于知道兩人是來自一個陣營的同志，也明白了徐飛虎就是那只“獵犬”。徐飛虎審訊俘虜得出資料在伍登科手里。強大龍…
馬烽帶著隊員來到古堡外圍，下令敢死隊潛入古堡。敢死隊和日寇拼死搏殺，終于將細菌武器葬送在熊熊烈火之中，粉碎了日寇發動細菌戰的陰謀。打亂了日寇的戰略部署。大島頂替了栗原的職務，他向美惠和山田傳達了軍…
