動畫講述了一只名叫做暮光閃閃/紫悅（Twilight Sparkle）的獨角獸，要執行她導師塞拉斯緹婭公主/宇宙公主（Princess Celestia）的任務，在小馬鎮/小馬谷（Ponyville）學習關于友誼的知識。她與另外五只小馬，蘋果杰克/蘋果嘉兒（Applejack）、瑞瑞/珍奇（Rarity）、云寶黛西/云寶（Rainbow Dash）、小蝶/柔柔（Fluttershy）與萍琪/碧琪（Pinkie Pie），成為最要好的朋友。每只小馬都分別代表了友誼的6個元素：誠實，慷慨，忠心，善良，歡笑，魔法，并在諧率水晶/和諧之元（Elements of Harmony）中，各自扮演著屬于自己的重要角色。在動畫中，隨時可見她們在小馬鎮/小馬谷（Ponyville）的種種冒險、奇遇、日常等等。同時，也在她們之間的互動和沖突中，尋找著最適合最合理的完美解決方案。“盡管小馬國并不太平，六位主角之間也常常有這樣那樣的問題，但是他們之間的真情對代，使得這個童話世界已經成為不少人心中理想的世外桃源。”